date:2019-02-26 10:49:26
我們知道ibidi最主要的細胞培養(yǎng)產(chǎn)品是ibitreat的表面。它是ibidi多聚物玻片親水,組織培養(yǎng)處理后的升級版。它可以和標準的細胞培養(yǎng)器皿的組織培養(yǎng)處理相媲美。它提高細胞了黏附,從而讓細胞可以更好的貼壁而不需要額外的包被處理,同時又能夠滿足了高分辨率顯微鏡觀察的要求。
現(xiàn)在ibidi反其道而行之,開發(fā)出來bioinert表面,一種沒有細胞和生物分子黏附的不可降解的鈍化表面。
Bioinert表面是一種薄的多羥基水凝膠層,它共價結(jié)合到了ibidi多聚物玻片上,它抑制了細胞表面結(jié)合,因此它極其適合懸浮細胞和球狀體的培養(yǎng)。與標準的超低吸附包被不同,Bioinert是徹底的不貼壁,不吸附任何生物分子,即便進行長時間的實驗。
技術(shù)特點:
1 無細胞吸附
Bioinert表面是一個200nm薄的多羥基水凝膠層,它和ibidid多聚物玻片共價結(jié)合
在一起。和標準的超低吸附包被不同,Bioinert是徹底不能貼壁,結(jié)合任何生物分
子的,即便進行長時間培養(yǎng)實驗。因此Bioinert技術(shù)可以為基于細胞分析的實驗提
供一個穩(wěn)定鈍化的表面長達幾日甚至幾周時間。
2 無細胞底物相互作用
Bioinert創(chuàng)造的環(huán)境中細胞細胞之間的相互作用遠遠超過了細胞底物之間的相互作
用,事實上后者完全被屏蔽了。Bioinert表面的穩(wěn)定性可以使得在同一個培養(yǎng)皿中
進行長達幾天甚至幾周的實驗而沒有任何蛋白粘附。即便你培養(yǎng)的細胞需要高濃
度的胎牛血清的培養(yǎng)液。Boinert可以阻止任何細胞或者蛋白吸附到表面。
3 無需事先準備
Bioinert表面可以立即使用。無需事先水化過程。表面在緩沖液或者細胞培養(yǎng)液濕
潤后立馬自己膨脹。
4 無自發(fā)熒光
平整,超薄的材質(zhì)以及ibidi多聚物玻片的優(yōu)秀光學特質(zhì)實現(xiàn)了高分辨率顯微鏡觀察
而沒有任何自發(fā)熒光的干擾
5 和所有的固定劑,染色試劑,浸鏡油兼容
6 無細胞毒性,生物學惰性,不可降解
應(yīng)用:
1 沒有支架條件下,生成和長時間培養(yǎng)球狀體和器官小體
2 高分辨率顯微鏡觀察器官小體,球狀體,胚胎小體和懸浮的細胞
3 無背景下分析細胞-細胞相互作用
4 阻止干細胞因為接觸而分化
5 在一個永遠不貼壁的狀態(tài)下培養(yǎng)懸浮細胞
6 自我組裝腫瘤球狀體形成實驗
7 3D腫瘤球狀體模型
規(guī)格:
Ø直徑 μ-Dish 35mm
體積 2ml
生長面積 3.5cm2
Ø觀察面積直徑 21mm
高度帶/不帶蓋子 14/12mm
底部 ibidi多聚物玻片帶有Bioinert表面
Bioinert 表面厚度 200nm
Bioinert 表面材質(zhì) 多羥基水凝膠
蛋白包被 不可以
應(yīng)用舉例1 利用Bioinert表面進行球狀體培養(yǎng)和3D投射
球狀體是通過HT-1080 Lifeact細胞株采用瓊脂糖覆蓋法生成的,然后轉(zhuǎn)移到了µ-Dish 35 mm, high Bioinert用于顯微鏡觀察
HT-1080 LifeAct球狀體共聚焦激光掃描圖
應(yīng)用2 利用Bioinert表面進行球狀體培養(yǎng)和FDA/PI染色
Bioinert表面非常適合于短期和長期的球狀體和器官小體的3D培養(yǎng),由于特異和非特異的細胞運動都被限制了,細胞被迫形成懸浮狀態(tài),從而形成了小的和大的球狀體。為了評估活力,細胞被FDA(標記活細胞)和PI(標記死細胞)染色。
HepG2球狀體切片共聚焦激光掃描圖
不同細胞株的球狀體是通過瓊脂糖覆蓋法形成的,然后再轉(zhuǎn)移到了µ-Dish 35 mm, high Bioinert 用于FDA/PI染色和活細胞成像。
不同細胞株球狀體的活細胞廣角熒光染色圖
應(yīng)用3 不同表面下貼壁細胞的培養(yǎng)
µ-Dish 35 mm, high Bioinert 適合培養(yǎng)各種類型的貼壁細胞。在Bioinert表面,細胞不互相吸附,在絕大多數(shù)細胞類型中都可以看見球狀體的形成。根據(jù)特定細胞類型的細胞-細胞粘附,形成的球狀體分布幾乎比較均勻。
在Ibitreat的表面上,所有貼壁細胞呈現(xiàn)出一個強烈的細胞粘附。在未包被的表面上由于僅有血清蛋白包被,所以看見微弱的細胞粘附。
.ibiTreat, 未包被, Bioinert表面在細胞培養(yǎng)情況下的對比圖
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