date:2022-05-12 15:52:17
腫瘤細胞在 3D 微環(huán)境中生長,與周圍環(huán)境相互交流、相互作用。細胞行為在 3D 基質(zhì)中培養(yǎng)與 2D 環(huán)境中不同。在許多情況下,3D 細胞培養(yǎng)設置更準確地反映了體內(nèi)的狀況。這包括使用球體和類器官的藥物篩選,這些球體和類器官如今作為腫瘤模型是必不可少的。在分析癌細胞行為、遷移、增殖、對藥物治療的反應以及基因和蛋白質(zhì)表達時,應考慮到這一點。
HT-1080 癌細胞在 3D 膠原蛋白凝膠中的侵襲。 將侵入性人纖維肉瘤癌球體 (HT-1080) 嵌入 I 型膠原蛋白大鼠尾凝膠中。 在 µ-Slide 8 孔中記錄侵入凝膠基質(zhì) 48 小時。 4x 物鏡,明場
PDAC細胞和成纖維細胞的類器官共培養(yǎng)。 人胰腺癌 (PDAC) 細胞系 PA-TU-8988T(綠色,用 CellTrackerTM Green 染色)和鼠成纖維細胞系 mPSC4(紅色,用 CellTrackerTM Orange CMTMR 染色)在 µ-Slide Spheroid Perfusion 中的類器官共培養(yǎng) . μ-Slide 覆蓋有 25 μm FEP 箔,用于在直立光片顯微鏡期間匹配更接近水的折射率。 該圖像由 MPI Muenster 的 S. Volkery 使用 M Squared Aurora Airy 光束直立光片設置獲取。 樣品由德國馬爾堡大學的 K. Roth 提供。
用于 3D 癌癥模型的 ibidi 解決方案
ibidi Collagen Type I, Rat Tail 是一種非胃蛋白酶處理的天然膠原蛋白,用于在凝膠基質(zhì)中對 ECM 進行建模。其快速聚合促進了 3D 凝膠中的最佳細胞分布。
µ-Slide Spheroid Perfusion 是一種用于長期球體培養(yǎng)的專用灌流小室。 3 x 7 孔中的每一個都形成了自己的微環(huán)境(niche),用于培養(yǎng)標本。通過孔頂部的通道進行灌注(例如,通過使用 ibidi 泵系統(tǒng))可確保在整個實驗過程中實現(xiàn)最佳營養(yǎng)和氧氣擴散,而不會使標本暴露在顯著的剪切力下。
具有多細胞 µ-Pattern載玻片可實現(xiàn)空間定義的細胞粘附,用于生成球體和類器官、長期培養(yǎng)和高分辨率成像。確定的粘附點能夠從細胞懸液中捕獲所有粘附的單細胞。周圍的 Bioinert 表面是完全不粘附細胞的。這迫使所有細胞在粘附點處相互聚集,從而以明確和可控的方式形成球體。
Bioinert 是一種穩(wěn)定的生物惰性表面,用于在非粘附表面上對球體、類器官和懸浮細胞進行長期培養(yǎng)和高分辨率顯微鏡檢查,無需任何細胞或生物分子粘附。它目前可作為 µ-Dish 35 mm、高 Bioinert、µ-Slide 8 Well 高 Bioinert、µ-Slide 4 Well Bioinert 和 µ-Slide VI 0.4 Bioinert。
在 µ-Slide III 3D 灌注中,單細胞、球體或類器官可以在凝膠層中或凝膠層上培養(yǎng)或嵌入 3D 基質(zhì)中。特殊的通道幾何形狀允許以低流速進行灌注(例如,當使用 ibidi 泵系統(tǒng)時),確保最佳的氧氣和營養(yǎng)供應。這種設置使長達數(shù)周的長期培養(yǎng)成為可能。此外,薄蓋玻片底部可高分辨率成像。
µ-Slide 血管生成和 µ-Plate 血管生成 96 孔是凝膠基質(zhì)上或凝膠基質(zhì)中單細胞、共培養(yǎng)物、球體和類器官的 3D 培養(yǎng)和顯微鏡觀察的簡單、經(jīng)濟高效的解決方案。凝膠層直接連接到上面的培養(yǎng)基儲存器,通過擴散可以快速輕松地更換培養(yǎng)基。對于特殊應用,還可提供帶有 1.5H 玻璃底的 µ-Slide 血管生成載玻片。
μ-Slide I Luer 3D 設計用于在具有定義剪切應力的 3D 凝膠基質(zhì)上或其中培養(yǎng)細胞。三個孔中的每一個都可以填充凝膠,細胞可以嵌入其中。對于定義流量的應用,頂部的通道可以連接到泵(例如,連接到 ibidi 泵系統(tǒng)),以確保最佳的氧氣和營養(yǎng)供應。
參考文獻:
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