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　　樣品制備

　　步驟

　　ibidi傷口愈合/劃痕實(shí)驗(yàn)的傷口間隙是通過(guò)使用ibidi Culture-Inserts插件產(chǎn)生的，由于確定的無(wú)細(xì)胞間隙的大小，這保證了極高的再現(xiàn)性。在合適的細(xì)胞培養(yǎng)容器中選擇合適的插件。接種和培養(yǎng)細(xì)胞，直到它們形成光學(xué)融合的單層。讓細(xì)胞生長(zhǎng)大約24小時(shí)。如有必要，用增殖抑制劑處理細(xì)胞，然后移除插件以產(chǎn)生間隙。

　　ibidi解決方案

　　ibidi開(kāi)發(fā)的傷口愈合產(chǎn)品，設(shè)計(jì)精巧，操作簡(jiǎn)單，標(biāo)準(zhǔn)化的數(shù)據(jù)分析方法恰恰彌補(bǔ)了傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)方法的不足。ibidi設(shè)計(jì)了一種雙孔的硅膠插件，可以放在培養(yǎng)皿或孔板中，插件兩孔間的孔壁寬度為500μm。將細(xì)胞種在插件中，等待細(xì)胞貼壁長(zhǎng)滿后，將插件移除，這樣，兩孔間的縫隙就是一個(gè)無(wú)細(xì)胞的“劃痕”。由于是制式的插件，所以兩孔間的縫隙寬度是均一的500μm。整個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟非常簡(jiǎn)單。

　　結(jié)果簡(jiǎn)單明了，重復(fù)性好，高質(zhì)量的底部材質(zhì)，使得成像效果極佳。配套ibidi傷口愈合分析軟件，幾分鐘就能得到測(cè)量結(jié)果。

　　ibidi Culture-Insert 2孔 /3孔 / 4孔插件可用于傷口愈合、遷移、2D侵襲測(cè)定和細(xì)胞的共培養(yǎng)的，具有無(wú)細(xì)胞確定間隙的硅膠插件。ibidi有25個(gè)/盒的單獨(dú)插件（實(shí)驗(yàn)人員可自行插入實(shí)驗(yàn)容器中），也有將插件預(yù)置在µ-Dish 35mm培養(yǎng)皿中的，為您提供快速而簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)設(shè)置。

　　Culture-Inserts 插件中最小和標(biāo)準(zhǔn)的傷口尺寸是 500 µm。 Culture-Insert 4 Well /4孔插件會(huì)有一個(gè)額外的中心間隙，傷口大小為 1000 µm。

　　即用型ibidi Culture-Insert 2 Well 24預(yù)置2孔插件的24孔板，可用于經(jīng)濟(jì)高效的高通量測(cè)定。

　　ibidi µ-Slide 2 Well 2孔腔室載玻片含2個(gè)具有理想尺寸的孔，可用于插入插件。

　　活細(xì)胞成像

　　步驟

　　在大多數(shù)情況下，應(yīng)在間隙產(chǎn)生后立即使用相差顯微鏡對(duì)細(xì)胞進(jìn)行監(jiān)測(cè)?？梢栽诓煌臅r(shí)間點(diǎn)拍攝間隙的照片（例如，在6和12小時(shí)之后）或進(jìn)行活細(xì)胞成像。通常，監(jiān)測(cè)細(xì)胞24小時(shí)或更短時(shí)間就足夠了。為了進(jìn)行準(zhǔn)確的分析，在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中觀察完全相同的間隙位置是很重要的。

　　ibidi的解決方案

　　 ibidi Stage Top Incubation System孵育系統(tǒng)在顯微鏡下提供生理環(huán)境，能夠在傷口愈合檢測(cè)和遷移檢測(cè)過(guò)程中對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行成像。

　　數(shù)據(jù)分析

　　步驟

　　典型的傷口愈合和遷移實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生千兆字節(jié)的成像數(shù)據(jù)，這些數(shù)據(jù)必須通過(guò)手動(dòng)圖像分析或使用自動(dòng)化軟件進(jìn)行進(jìn)一步處理和分析。在許多實(shí)驗(yàn)裝置中，主要的讀數(shù)是傷口閉合的速度。其他可能的讀數(shù)是無(wú)細(xì)胞區(qū)域和細(xì)胞覆蓋區(qū)域的測(cè)量值。

　　ibidi的解決方案

　　通過(guò)Wound Healing FastTrack AI Image Analysis傷口愈合快速跟蹤人工智能圖像分析軟件，ibidi為傷口愈合和遷移分析的定量提供了一個(gè)省時(shí)、全自動(dòng)的解決方案。它包括對(duì)無(wú)細(xì)胞區(qū)域、細(xì)胞覆蓋區(qū)域和傷口愈合速度的分析。